Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6) 是一種結(jié)合了甲基四嗪（Me-tetrazine）和近紅外熒光染料花青素5.5（Cyanine5.5，Cy5.5）的功能化熒光探針，其六氟磷酸鹽（PF6?）形式提供了良好的溶解性與穩(wěn)定性。

一、基本信息

• 中文名稱(chēng)：甲基四嗪-Cy5.5（六氟磷酸鹽）

• 英文名稱(chēng)：Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)

• 分子式：C50H52F6N7OP

• 分子量：911.98

• 外觀：藍(lán)色固體

• 純度：≥95%

• 規(guī)格：通常有5mg、10mg、25mg等多種規(guī)格，也可定制

• 保存條件：-20℃以下儲(chǔ)存，干燥、避光，避免反復(fù)凍融

二、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

• 甲基四嗪環(huán)：作為電子缺陷的芳香雜環(huán)，能夠在逆電子需求Diels-Alder（IEDDA）點(diǎn)擊反應(yīng)中與受拉伸的炔烴（如反式環(huán)辛烯TCO、降冰片烯DBCO）快速、特異性地共價(jià)結(jié)合。這種反應(yīng)無(wú)需催化劑，生物相容性較佳，適用于活體應(yīng)用，且超高特異性，幾乎不與任何生物內(nèi)源性分子反應(yīng)。

• Cyanine5.5（Cy5.5）染料：屬于菁染料家族，發(fā)射波長(zhǎng)≈680-720nm，處于近紅外一區(qū)的末端。此波段的光受生物組織散射和吸收最小，適合深層組織成像，且生物樣本在此波段的自發(fā)熒光幾乎為零，信噪比較高。Cy5.5還具備高光穩(wěn)定性和高熒光強(qiáng)度，適合長(zhǎng)時(shí)間動(dòng)態(tài)追蹤。

• PF6?對(duì)離子：六氟磷酸根提升化合物的溶解性與熱穩(wěn)定性，便于在有機(jī)溶劑中保存與使用。

• 共價(jià)連接橋段：通過(guò)酰胺或醚鍵將四嗪與Cy5.5連接，保持兩端功能團(tuán)的獨(dú)立性，同時(shí)保證整體分子在水/有機(jī)混合體系中的可溶性。

三、應(yīng)用

• 生物正交標(biāo)記：Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)中的四嗪基團(tuán)可以與TCO修飾的生物分子發(fā)生IEDDA反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)特異性標(biāo)記。這種標(biāo)記方法具有高反應(yīng)速率和高選擇性，適用于蛋白質(zhì)、核酸等生物分子的標(biāo)記。

• 熒光成像：利用Cy5.5的強(qiáng)近紅外熒光特性，Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)可用于深層組織成像，減少生物樣品中的自發(fā)熒光背景干擾，提高成像的清晰度和準(zhǔn)確性。

• 活體成像：將Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)標(biāo)記在特異性抗體上，利用IEDDA與體內(nèi)預(yù)先修飾的TCO-抗體或納米顆粒快速結(jié)合，實(shí)現(xiàn)近紅外（NIR）活體熒光成像，用于手術(shù)導(dǎo)航或療效評(píng)估。

• 藥物遞送追蹤：藥物或納米載體先通過(guò)TCO修飾，隨后用Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)“點(diǎn)亮"，實(shí)現(xiàn)藥物在體內(nèi)的定位、定量追蹤，并可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)釋放部位。

• 多模態(tài)成像：結(jié)合Cy5.5的NIR發(fā)射與tetrazine的快速反應(yīng)，可與其他熒光或放射性標(biāo)記聯(lián)合，實(shí)現(xiàn)雙模/三模成像，提升空間分辨率與靈敏度。

四、特點(diǎn)

• 高反應(yīng)活性：甲基四嗪基團(tuán)賦予Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)高反應(yīng)活性，能夠快速、選擇性地與目標(biāo)分子結(jié)合。

• 強(qiáng)熒光信號(hào)：Cy5.5熒光染料提供強(qiáng)烈的熒光信號(hào)，便于檢測(cè)和成像。

• 良好的光穩(wěn)定性：Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)的熒光特性相對(duì)穩(wěn)定，能夠在一定時(shí)間內(nèi)保持其熒光強(qiáng)度，從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

• 生物相容性：Me-tetrazine-Cyanine5.5 (PF6)具有良好的生物相容性，適用于生物體系中的應(yīng)用。

• 熒光“開(kāi)啟"效應(yīng)：在未反應(yīng)前，tetrazine的電子結(jié)構(gòu)會(huì)淬滅Cy5.5的熒光；完成IEDDA反應(yīng)后，熒光被激活，信號(hào)增強(qiáng)，提供熒光開(kāi)關(guān)的特性，降低未反應(yīng)探針的背景噪聲，進(jìn)一步提升檢測(cè)靈敏度。

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